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高效液相色譜在食品檢測中的應(yīng)用

文檔作者：衛(wèi)潤鑫徐子婷文檔來源：河南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院		點擊數(shù)：	更新時間： 2025年06月13日
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78 食品安全導(dǎo)刊 2017年7月
Technology
科技
分析與檢測
高效液相色譜法在食品檢測中已
經(jīng)應(yīng)用很長時間，高效液相色譜法的缺
點也很明顯，設(shè)備成本較高，檢測樣本
需要數(shù)量大，標本前處理過程復(fù)雜，對
操作人員要求高，目前臨床使用較少。
而且，HPLC 雖然能夠分開25-（OH）
D2 和25-（OH）D3， 但25-（OH）D2
濃度太低，HPLC 檢測限達不到要求[1]。
由于維生素D 不穩(wěn)定、測定方法復(fù)雜、
變異大和受影響因素多等特點，目前
維生素測定方法主要采用高效液相色
譜法，可以測定蛋白質(zhì)、多肽、碳水
化合物、核酸、寡核苷酸等物質(zhì)，有
分辨率高、高效率分離的特點[2]。
1 高效液相色譜法特點
1.1 高壓
液相色譜法以載液形式傳輸，液
體在傳輸?shù)倪^程中會到達色譜柱，在色
譜柱內(nèi)阻力較大，因此要迅速地通過色
譜柱，必須對載液施加高壓。需要的壓
強一般為（150 ～ 350）×105 Pa[3]。
1.2 高速
流動相流速在柱內(nèi)速度可達
1 ～ 10 mL/min。高效液相色譜法耗時
短，一般少于1 h[4]。
1.3 高效
高效液相色譜法在食品檢測的應(yīng)
用效率比其他方法更高效穩(wěn)定，這主
要得益于高壓，高速的環(huán)境下，流動
相的高效親和力更有利于色譜分析。
2 性質(zhì)及原理
高效液相色譜法，根據(jù)固定相可
以分為凝膠滲透色譜可以分為高效疏
水色L 高分辨率反相高效液相色譜法和
離子交換色譜和高效高親和力的高效液
相色譜類型。用不同類型高效液化合物
分離原理基本上與普通液體色譜分析相
似。高效液相色譜法的特點是高分辨
率、快速、靈敏和重復(fù)性好[5-6]。
IEC 本質(zhì)上是離子交換的產(chǎn)物，交
換過程可表示為：[X-( 溶劑中]+[ 樹
脂-R4N+Cl-]= [樹脂-R4N+X-]+Cl-[ 溶
劑中]。
當交換過程達到平衡時：KX=[-
R4N+X-][Cl-]/[-R4N+Cl-][X-]。
分配系數(shù)為：DX=[-R4N+X-]/
[X-]=KX[-R4N+Cl-]/[Cl-]。
只要能在溶劑中電離的物質(zhì)通常都
可以用離子交換色譜法來做色譜分離。
3 實驗
3.1 原理
選取維生素在皂化過程中與脂肪
分離，以石油醚萃取后，用正相色譜
柱提取富集，用反相色譜柱，紫外檢
測器定量測定。
3.2 適用范圍
本方法來源于GB/T 5413.9 －
1997 一般食品和乳粉維生素A、維生
素D、維生素E 的測定。適用于大部
分食品或強化食品及飼料中的維生素D
含量的測定。
3.3 主要儀器
高壓液相色譜儀（具有可變波長的
紫外檢測器，數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)或記錄儀）；
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；平底燒瓶（250 mL）；分
液漏斗（500 mL）。
3.4 試劑
所有試劑，如未注明規(guī)格，均指
分析純，所有實驗用水均指蒸餾水。
異丙醇（色譜純）；2％焦性沒食子酸
乙醇溶液（取2 g 焦性沒食子酸溶于
100 mL 無水乙醇中）；75％氫氧化鉀
溶液（取75 g 氫氧化鉀溶于100 mL
水中）；石油醚（沸程30 ～ 60 ℃）；
甲醇（色譜純）；正己烷（色譜純）；
環(huán)己烷（色譜純；）維生素D 標準溶液。
3.5 計算
X=[(As/Asd)×ρs×ρ]sd/m
式中：X—— 樣品中維生素D，
mg/100g；
m——稱樣量，含量，IU/100g；
ρs—— 進樣液中維生素D 的濃
度，μg/mL；
As——進樣液中維生素D 的峰面
積，μg；
Asd—— 標樣中維生素D 的峰面
積，μg；
ρsd——標樣中維生素D 的濃度，
μg/mL。
3.6 實驗結(jié)果
稱取嬰兒奶粉10.8 g， 經(jīng)過
實驗的提取取后， 測得維生素D 峰
面積為18 692μg， 標樣峰面積為
24 767μg，帶入公式計算，得出奶粉
中維生素D 的含量398.0 IU/100g。
4 結(jié)論
隨著現(xiàn)在食品行業(yè)的快速發(fā)展，人
們對食品安全越來越重視，高效液相色
譜分析技術(shù)也日漸完善，高效液相色譜
分析法將會在未來應(yīng)用越來越廣泛。
參考文獻
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作者簡介：衛(wèi)潤鑫（1988—），男，
河南鄭州人，本科，工程師。研究方向：
食品分析。
高效液相色譜在食品檢測中的應(yīng)用
□ 衛(wèi)潤鑫 徐子婷 河南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院
摘 要：本文分析了高效液相色譜法特點，性質(zhì)及原理，利用高效液相色譜法進行試驗，對樣品維生素在皂化過程會
發(fā)生分離，檢測奶粉中維生素D 的含量，最終得出奶粉中維生素D 的含量為398.0μg/100g。
關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；維生素D；食品檢測

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