導(dǎo)航：安全管理網(wǎng)>> 安全論文>> 食品安全論文>>正文

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品檢測分析中的研究進展

文檔作者：石超呂長鑫馮敘橋李萌萌劉蘇蘇文檔來源：渤海大學(xué)化學(xué)化工與食品安全學(xué)院遼寧省食品安全重點實驗室,		點擊數(shù)：	更新時間： 2025年07月10日
下載地址：點擊這里	文件大?。?995.85 KB 共7頁	文檔格式： PDF	下載點數(shù)： 1 點（VIP免費）

全屏查看

內(nèi)容預(yù)覽 [文件共7頁]

本文件共7頁，如需編輯使用，請下載。

注：預(yù)覽效果可能會出現(xiàn)部分文字亂碼（如口口口）、內(nèi)容顯示不全等問題，下載是正常的。

	文件大?。?95.85 KB 共7頁文件格式：PDF 下載點數(shù)：1 點（VIP會員免費）

上一篇：綠色食品工程在控制食品化學(xué)污染中的效能…

文本預(yù)覽

僅提取頁面文字內(nèi)容，供快速閱讀使用。

第5 卷 第10 期 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報 Vol. 5 No. 10
2014 年10 月 Journal of Food Safety and Quality Oct. , 2014
基金項目: 遼寧省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)計劃項目(2011205001)、渤海大學(xué)人才引進基金項目(BHU20120301)、“十二五”國家科技支撐計劃項
目(2012BAD29B06)
Fund: Supported by Agriculture Brainstorm Project of Technology in Liaoning Province (2011205001), Talents Introduction Fund Project of
Bohai University (BHU20120301) and “the Twelfth Five” National Key Technology R &amp;amp; D Project (2012BAD29B06)
*通訊作者: 呂長鑫, 教授, 主要研究方向為農(nóng)產(chǎn)品貯藏加工與食品資源開發(fā)。E-mail: lvchangxin6666@163.com
馮敘橋, 教授, 主要研究方向為果蔬質(zhì)量與安全控制。E-mail: feng_xq@hotmail.com
*Corresponding author: LV Chang-Xin, Professor, Food Science Research Institute of Bohai University, No.19, Science and Technology Road,
Mstsuyama District, Jinzhou 121013, China. E-mail: lvchangxin6666@163.com
FENG Xu-Qiao, Professor, Food Science Research Institute of Bohai University, No.19, Technology Road, Songshan District, Jinzhou 121013,
China. E-mail: feng_xq@hotmail.com
酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品檢測分析中的研究進展
石 超, 呂長鑫*, 馮敘橋*, 李萌萌, 劉蘇蘇
(渤海大學(xué)化學(xué)化工與食品安全學(xué)院, 遼寧省食品安全重點實驗室, 錦州 121013)
摘要: 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣泛的技術(shù), 是將已知的抗原或抗體吸附在固
相載體表面, 使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行, 通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng), 用洗滌法將液相中的游
離成分除去后再進行定量測定。主要分為夾心法、間接法和競爭法。本文簡要介紹了幾種常用方法及其基本
作用機制, 詳述了ELISA 檢測技術(shù)在食品檢測中具體應(yīng)用及發(fā)展歷史與現(xiàn)狀, 對其在食品中農(nóng)藥殘留、病原微
生物、生物毒素、轉(zhuǎn)基因食品、重金屬殘留、過敏性殘留物及違規(guī)添加成分檢測等方面的應(yīng)用情況進行系統(tǒng)
總結(jié), 并對其發(fā)展前景進行了分析。
關(guān)鍵詞: 酶聯(lián)免疫吸附; 食品檢測; 研究進展
Advances in food determination and analysis of enzyme-linked
immunosorbent assay
SHI Chao, LV Chang-Xin*, FENG Xu-Qiao*, LI Meng-Meng, LIU Su-Su
(College of Chemistry, Chemical Engineering and Food Safety, Bohai University, Food Safety Key Lab of Liaoning
Province, Jinzhou 121013, China)
ABSTRACT: Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is the most widely used technique in the enzyme
immunoassay techniques. The antigen or antibody is adsorbed on the surface of the solid phase carrier, antigen-
antibody reaction on the surface of the carrier, produce a color reaction by the enzyme and substrate, then
quantitative determination after washed the free ingredients of the liquid phase. The ELISA technique is mainly
divided into sandwich method, the indirect method and competition law. This paper describes the common method
and basic mechanism of action of the enzyme-linked immunosorbent assay, and details their specific application
and development in detection of pesticide residues, pathogenic microorganisms, biotoxins, genetically
modified food, heavy metal residues, allergic residues and illegal additives, and finally summarizes and analyzes
its prospects.
KEY WORDS: enzyme-linked immunosorbent assay; food detection; research progress
3270 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報 第5 卷
1 引 言
酶是一種有催化作用的蛋白質(zhì), 具有高效和專一等
特點。目前, 國際生物化學(xué)聯(lián)合會把酶分成氧化還原酶類、
轉(zhuǎn)移酶類、水解酶類、裂合酶類、異構(gòu)酶類和合成酶類六
大類[1]。自1894 年日本學(xué)者高峰讓吉首次應(yīng)用酶制劑, 到
20 世紀前半葉西方國家把木瓜酶、胰酶、細菌淀粉酶分別
用于啤酒、制革和紡織行業(yè)中, 至今, 酶制劑已廣泛應(yīng)用于
食品、印刷、醫(yī)藥、石油化工等各大領(lǐng)域[2]。
近年來, 國內(nèi)外將酶制劑應(yīng)用于食品的分析檢測中,
有效地提升了食品檢測的速度和準確性, 在特異性和靈敏
性方面也明顯優(yōu)于其他檢測方法, 顯著提高了檢測的效
率。酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)技術(shù), 又稱酶標(biāo)法, 是一種在免
疫酶學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型免疫測定技術(shù), 此法在食品
檢測方面更表現(xiàn)出很大優(yōu)勢, 并在該領(lǐng)域迅速發(fā)展。本文
將對ELISA 在食品中檢測應(yīng)用及研究進展進行總結(jié)。
2 酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)技術(shù)
酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)起始于瑞典學(xué)者Engvall 和
Perlmann 在1971 年發(fā)表的《酶聯(lián)免疫吸附試驗用于IgG
定量測定》的文章中[3], 這項技術(shù)的產(chǎn)生, 使1966 年用于
抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成為可測定液體標(biāo)本中微量
物質(zhì)的一種新方法[4,5]。此項技術(shù)較之于傳統(tǒng)的分析檢測方
法, 具有實用性強、靈敏度高、選擇性好、分析結(jié)果準確
等一系列優(yōu)點, 故ELISA 已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、
食品分析、分析化學(xué)等各大領(lǐng)域。
2.1 ELISA 基本原理及優(yōu)點
酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)是將免疫活性未被破壞的抗原或
者抗體結(jié)合到特定固相載體的表面, 使其與某種酶結(jié)合成
酶標(biāo)抗原或抗體, 此酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,
又保留了酶的活性。在測定時, 將含待檢抗體或抗原的受
檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按照不同的程序步驟與固相載體
表面的抗原或抗體反應(yīng), 得到抗原或抗體的復(fù)合產(chǎn)物, 過
程見圖1。接著, 通過洗滌方式使固相載體上抗原或抗體的
復(fù)合物與其他物質(zhì)分離, 最后固相載體上的酶量與標(biāo)本中
待檢物質(zhì)的量成一定比例。加入酶反應(yīng)底物后, 底物經(jīng)酶
催化形成有色產(chǎn)物, 此產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量有
直接關(guān)系, 故可根據(jù)顏色反應(yīng)對結(jié)果進行定性或定量分
析。由于酶催化頻率極高, 因此反應(yīng)效果可最大化顯示, 可
使測定結(jié)果具有很高的敏感度, 使結(jié)果高度可信[6-9]。
2.2 ELISA 方法類型
ELISA的測定方法分類并無統(tǒng)一標(biāo)準, 但可根據(jù)試劑
來源、標(biāo)本性狀及檢測條件等方面將現(xiàn)有的檢測技術(shù)分為
夾心法、間接法、競爭法和捕獲法四種方法。每種ELISA
檢測方法的特點和應(yīng)用見表1。
除上述幾種方法外還有ELISA 與其他方法或成分相
結(jié)合的檢測方法, 如ABS (avidin biotin system)-ELISA 法、
PCR-ELISA 法、斑點免疫酶結(jié)合試驗(DIA)等[12]?？筛鶕?jù)
條件及要求自主設(shè)計適當(dāng)?shù)臏y定方法。使檢測過程更簡單
快捷, 結(jié)果更準確。
3 ELISA 在食品檢測中的發(fā)展及應(yīng)用
3.1 食品中農(nóng)藥殘留的檢測
農(nóng)藥殘留是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中施用農(nóng)藥后, 一部分農(nóng)藥
直接或間接的殘留于谷物、果蔬等食品中的一種現(xiàn)象。農(nóng)
藥殘留目前已成為我國主要的食品安全問題之一, 直接影
響我國農(nóng)副產(chǎn)品的質(zhì)量[13]。
自1977 年, Ercegnvich 等[14]首次將免疫技術(shù)應(yīng)用于對
硫磷的檢測, 打破了傳統(tǒng)的復(fù)雜且需要昂貴儀器的檢測技
術(shù), 使農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)邁入了一個新的高度。1994 年
Ibrahim 等[15]采用雜交瘤技術(shù)制備對硫磷特異性單克隆抗
體, 并使用ELISA 技術(shù)檢測其含量, 實現(xiàn)了將ELISA 應(yīng)用
到有機磷農(nóng)藥的檢測。2000 年, Katsoudas 等[16]建立了檢測
新鮮食品中氨基甲酸酯類殺蟲劑殘留的ELISA 方法, 并在
櫻桃、香蕉、桃子和西紅柿等水果中應(yīng)用ELISA 檢測胺甲
萘及蟲螨威兩種殺蟲劑。2003 年, Lee [17]等深入的研究了
乙酰甲胺磷的酶聯(lián)免疫分析方法, 首先選擇并合成了五種
半抗原, 通過免疫得到其抗體, 成功建立乙酰甲胺磷的
ELISA 檢測方法, 在異源ELISA 檢測體系中, 檢測的IC50
為25 ng/mL, 最低檢出限達到了2 ng/mL, 且此法的特異
圖1 抗原或抗體復(fù)合物后顯色反應(yīng)
Fig. 1 Color reaction after the complex with the antigen or antibody
第10 期 石 超, 等: 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品檢測分析中的研究進展 3271
表1 ELISA 檢測方法及特點[10,11]
Table 1 The method and characteristics of ELISA[10,11]
方法 特點 應(yīng)用
夾心法
分別以兩種抗體對檢體中的抗原進行兩次專一性辨認, 因此專一性相當(dāng)高, 但此待測抗原必須是
多價抗原, 如此才可獲得兩種以上的專一性抗體, 以分別進行夾心
夾心法
通常用于檢測抗原。
間接法
此法只需更換不同的固相抗原, 可用一種酶標(biāo)抗體對各種相應(yīng)的抗體進行檢測檢測, 故稱為間
接法。
間接法
通常用于檢測抗體。
競爭法
當(dāng)需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原, 或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上
時, 一般會考慮使用競爭法ELISA。
應(yīng)用較少, 多數(shù)用于
檢測小分子抗原
捕獲法
血清中針對某些抗原的特異性IgM 常和特異性IgG 同時存在, 后者會干擾IgM 抗體的測定。先將
所有血清IgM(包括異性IgM 和非特異性IgM)固定在固相上, 在去除IgG 后再測定特異性IgM。
測定IgM 抗體
表2 主要農(nóng)藥殘留的酶聯(lián)免疫分析
Table 2 The main pesticide residue analysis by ELISA
農(nóng)藥類別 農(nóng)藥名稱 測定方法 抗體類型 測定樣本 檢測限
殺蟲劑
對硫磷 RIA ELISA 多抗、單抗 蔬菜、血漿 0.28~20 ng/mL
殺螟松 ELISA 多抗、單抗 谷物 80~100 μg/kg
甲胺磷 ELISA 多抗 蔬菜、谷物 0.032~500 ng/mL
西維因 ELISA 多抗 奶、蜂蜜、肉類、水 0.01~100 ng/mL
呋喃丹 ELISA 多抗 奶、肉類、血漿 0.01 mg/L
滅多威 ELISA 多抗 兔毛 0.9 ng/g
菊酯(總量) ELISA 多抗 肉類 50~500 μg/kg
氰戊菊酯 ELISA 多抗 水 0.1~4.8 μg/L
甲基嘧啶硫磷 ELISA 多抗 谷物 30 μg/kg
殺菌劑
多菌靈 ELISA 多抗 果汁、土壤、水 0.1~300 ng/mL
噻菌靈 ELISA 多抗、單抗 果汁、蔬菜、肉類 9~20 ng/g
克菌丹 ELISA 多抗 果汁 1 mg/mL
異菌脲 ELISA 多抗 啤酒、果汁 0.15~10 μg/kg
硝苯唑 ELISA 單抗 肝臟 20 μg/kg
福美雙 ELISA 多抗 葉類蔬菜 5 ng/mL
除草劑
草甘膦 ELISA 多抗 水 0.076 mg/mL
百草枯 ELISA 多抗 奶制品、肉制品 2.5 ng/mL
2.4-D ELISA 多抗 奶制品、土壤、水 1~50 ng/mL
麥草畏 ELISA 多抗 水 0.23 mg/L
西瑪津 ELISA 多抗 水、奶粉 1~10 ng/mL
莠去津 ELISA 多抗 土壤、水 0.01 ng/mL
吡草胺 ELISA 單抗 土壤、水 0.05~0.1 ng/mL
氯磺隆 ELISA 多抗 土壤 0.1 μg/mL
阿特拉律 ELISA 多抗 奶、果汁、玉米 0.5~2 μg/kg
3272 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報 第5 卷
性很好, 對結(jié)構(gòu)相類似的甲胺磷農(nóng)藥幾乎無交叉反應(yīng)。同
年, 國內(nèi)學(xué)者朱國念等[18]利用直接竟?fàn)嶦LISA 試劑盒來檢
測克百威殺蟲劑, 結(jié)果表明, 該試劑盒最低檢測限為 0.01
mg/L, 樣品的檢測結(jié)果表明其批內(nèi)、批間、整體變異系數(shù)
均小于8%, 回收率均達到90%以上, 符合農(nóng)藥殘留的檢測
分析要求。隨著研究的深入, 越來越多的ELISA 檢測方法
應(yīng)用到了農(nóng)藥殘留檢測中, Kumar 等[19]、Yang 等[20]、Jee
等[21]分別利用不同的單克隆抗體或多克隆抗體, 建立了有
機磷農(nóng)藥殘留的ELISA 檢測方法, 且結(jié)果表明此類方法靈
敏度高、特異性好, 對其他有機磷農(nóng)藥幾乎無交叉反應(yīng)。
2008 年, 張駿等[22]研究了測定食品中硫丹殘留ELISA 檢
測方法, 得到結(jié)果的樣品添加回收率為82.6%~112 %, 變
異系數(shù)為3.65%~16.97%, 通過與氣象色譜法的分析結(jié)果
進行比對, 確定了ELISA 方法測定農(nóng)藥殘留的可行性。文
孟棠等[23]在2014 年通過間苯氧基苯甲酸(PBA)為半抗原,
使用活性酯法、混合酸酐法和6-氨基己酸法偶聯(lián)雞卵清
蛋白(OVA)制備出三種抗原, 成功建立了大白菜中擬除蟲
菊酯類農(nóng)藥殘留的酶聯(lián)免疫吸附檢測試驗。ELISA 至今
已成為眾多權(quán)威機構(gòu)檢測分析農(nóng)藥殘留的首選方法, 并
已建立幾十種檢測方法, 其中包括了幾乎所有的殺蟲劑、
殺菌劑、除草劑等農(nóng)藥的ELISA 檢測方法。具體如表2
所示[24]。許多發(fā)達國家, 如英、美、德國等已開發(fā)出相應(yīng)
的商品ELISA 檢測試劑盒可用于直接檢測果蔬等植物性
食品中的農(nóng)藥殘留[25]。
3.2 食品中病原微生物的檢測
當(dāng)食品被病原微生物污染后, 被人體攝入體內(nèi)會引
起人體病變、中毒甚至突變、致癌等危害, 所以病原微生
物的檢測在食品檢測中尤為重要[26]。
1986 年, Lin 等[27]采用ELISA 方法對番茄醬中的三種
霉菌進行檢測, 結(jié)果表明該檢測法靈敏度高于化學(xué)試劑檢
測, 為病原微生物檢測方式的創(chuàng)新提供了新的思路。隨后,
文其乙等[28]1995 年從四株已獲得的沙門氏菌屬特異雜交
瘤單克隆抗體中, 篩選出CB8 和De7 兩株合成的單克隆抗
體酶標(biāo)檢測試劑, 建立了一種直接ELISA 方法用以檢測沙
門氏菌, 結(jié)果表明此法快速、高效、靈敏且結(jié)果準確。而
Yu 等[29]在2004 年間接法ELISA 測定VBNC 大腸桿菌
O157: H7 的實驗也充分揭示了ELISA 在食品中病原微生
物的檢測中的優(yōu)勢及前景。2012 年, 吳大成等[30]建立了雙
抗夾心法ELISA 檢測腸出血性大腸桿菌O157, 結(jié)果顯示
此法只對O157 菌株有特異性反應(yīng), 與其他菌株無交叉反
應(yīng)。并通過敏感性試驗確定其在牛肉、豬肉和雞肉中的檢
出限為0.4~4 CFU/g。目前ELISA 法已可用于檢測食品中
沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、軍團菌、大腸桿菌等致病微
生物。傳統(tǒng)的病原微生物檢測方法檢驗周期長且精密度低,
甚至通過肉眼觀察計數(shù), 結(jié)果缺乏準確性。因此, 在一定程
度上使ELISA 在病原微生物檢測方面有了很大的利用價
值和發(fā)展空間。
3.3 食品中生物毒素的檢測
生物毒素為一大類生物活性物質(zhì)的總稱, 是各類生
物產(chǎn)生菌在適合產(chǎn)毒的條件下所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。其
結(jié)構(gòu)通常不會受到加熱、烹調(diào)等熱處理及一般的食品加工
處理方式的影響, 所以食品中生物毒素的檢測在檢驗食品
安全性中十分重要[31]。
目前糧油類食品中污染最重、毒性最強的真菌毒素是
黃曲霉毒素。1977 年, LaWell 等[32]人首次應(yīng)用ELISA 法
檢測黃曲霉毒素, 利用小分子黃曲霉毒素B1結(jié)合蛋白質(zhì)免
疫動物從而得到抗黃曲霉毒素B1 的免疫球蛋白, 合成了酶
標(biāo)黃曲霉毒素B1 結(jié)合物, 并建立直接競爭ELISA 法以檢
測黃曲霉毒素B1。隨后, Chu and Morge 等[33]對此法進行改
進, 建立了間接競爭ELISA 法。我國也在1997 年出臺了
《食品衛(wèi)生理化檢驗方法》(GB/T50009.22-1996), 將兩種
ELISA 檢測方法列入國家標(biāo)準。經(jīng)過深入研究, 國內(nèi)學(xué)者
劉冬兒[34]在2002 年使用ELISA 法測定了食品中黃曲霉毒
素B1, 線性范圍為0.25~5.0 ng/mL, 檢測靈敏度達到了
0.015 μg/kg, 是薄層色譜法的300~400 倍, 回收率高于
89.2%, 精密度在7.67%以上, 且整個測定過程僅為4 h,
極大縮減了檢測周期。其結(jié)果充分表明ELISA 檢測黃曲
霉毒素B1 高效、快捷且結(jié)果可信度高, 效果理想。2009
年, 董雪等[35]采用直接競爭ELISA 法檢測河豚毒素。通
過過碘酸鈉氧化法合成了酶標(biāo)記抗原, 對合成的酶標(biāo)記
抗原使用直接ELISA 法進行檢測, 以表明其與抗河豚毒
素單克隆抗體之間存在特異性反應(yīng), 在此基礎(chǔ)上建立了
直接競爭ELISA 法用以檢測河豚毒素。結(jié)果表明ELISA
法檢測河豚毒素具有高靈敏度、特異性好及高效率等優(yōu)點,
可用于河豚毒素的定量檢測, 并可進一步開發(fā)成為商品化
的ELISA 試劑盒。
3.4 轉(zhuǎn)基因食品的檢測
早在1983 年世界上首個轉(zhuǎn)基因作物誕生至今, 轉(zhuǎn)基
因技術(shù)發(fā)展迅速, 全世界已有50 多個國家開展轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?
特別在農(nóng)作物的基因改良方面更是突飛猛進[36]。
在1999 年, Rogan 等[37]首次使用ELISA 法檢測出混
有2％Roundup Read 大豆的傳統(tǒng)大豆制品中的CP4-EPSPS
蛋白質(zhì)。并通過此法的高選擇性和靈敏性, 證實了ELISA
檢測方法在轉(zhuǎn)基因食品的檢測中具有可利用性。2001 年,
林良斌等[38]采用ELISA 方法檢測到Bt1 殺蟲蛋白基因在轉(zhuǎn)
基因油菜中的表達。2002 年, 劉光明等[39]利用純化的Btl
殺蟲晶體蛋白作為免疫抗原, 通過抗體-抗原-酶標(biāo)抗體反
應(yīng), 建立了ELISA 檢測方法, 定量檢測轉(zhuǎn)基因玉米中的
Bt1 蛋白, 并用所建立的ELTSA 法分別對四種進口玉米產(chǎn)
品進行了檢測, 結(jié)果與進口試劑盒方法的定量分析結(jié)果相
一致, 因而確定所建立的ETISA 簡便快捷且結(jié)果準確, 證
第10 期 石 超, 等: 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品檢測分析中的研究進展 3273
明了ELISA 檢測技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測中有很大發(fā)展前
景。2007 年, 顧煒煒等[40]在酶標(biāo)抗原和多克隆抗體的基礎(chǔ)
上, 研制出Btcry2Ab/2Ac 殺蟲蛋白的直接競爭 ELISA
試劑盒, 可對其轉(zhuǎn)基因蛋白進行快速、大批量的檢測分析。
這一系列研究使ELISA 技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品的蛋白水平檢
測中迅速發(fā)展。美國率先研究出利用雙夾心ELISA 法檢測
食品中的轉(zhuǎn)基因玉米成分, 并通過美國食品藥品監(jiān)督管理
局(FDA)認證, EnviroLogix ELISA 試劑盒可以測定玉米中
的Cry9C 蛋白。目前世界各國的專家學(xué)者正在研究更多用
于檢測轉(zhuǎn)基因食品的ELISA 試劑盒。
3.5 食品中其他成分的檢測
3.5.1 食品中重金屬殘留的檢測
金屬硫蛋白是一種對重金屬離子有很強親和力的低
分子量蛋白質(zhì), 含豐富的半胱氨酸(約1/3), 不含芳香族氨
酸和組氨基酸。劉功良等[41]介紹了以金屬硫蛋白制備金屬
免疫原, 進而建立競爭性ELISA 檢測方法對重金屬離子濃
度進行檢測[42]。
3.5.2 食品中過敏性殘留物的檢測
牛奶、雞蛋、魚、甲殼類(蝦、蟹、龍蝦)、花生、大
豆、核果類(杏、板栗、腰果等)及小麥八類食品中可能含
有過敏性成分, 其中多數(shù)為蛋白質(zhì), 會引起食用者的過敏
反應(yīng)。目前已有建立夾心ELISA 法以檢測雞蛋過敏性蛋白
質(zhì)、花生蛋白過敏物、β-球蛋白過敏物等的相關(guān)報道[43]。
3.5.3 食品中違規(guī)添加成分的檢測
李霜等[44]通過對靈敏度、特異性、可重復(fù)性、檢出限
等方面對市售的三聚氰胺ELISA 檢測試劑盒進行評價研
究, 研究表明該試劑盒具有較好的準確性、特異性及重復(fù)
性, 批間變異與耐變性也在可接受范圍內(nèi), 結(jié)果表明該法
可用于液態(tài)奶、乳粉中三聚氰胺殘留的檢測。
除上述幾種食品中成分的檢測外, ELISA 技術(shù)還可
應(yīng)用于食品中其他成分的測定, 如功能性因子、毒品生物
堿、違禁添加劑、營養(yǎng)素、抗生素殘留等。目前也有相關(guān)
研究報道, 但尚處于發(fā)展起步階段且與其他檢測方式相比
優(yōu)勢并不明顯, 故不在此一一贅述。
4 結(jié)語與展望
目前ELISA 技術(shù)已被應(yīng)用于諸多的食品檢測領(lǐng)域,
與其他檢測方式相比, 不需要昂貴的精密儀器, 降低了測
定成本, 同時也顯示出其本身的方便、快捷、靈敏度高、
檢測結(jié)果準確等眾多優(yōu)勢。而對其研究卻仍處于起步階段,
尤其我國在這方面的研究較之國外存在一定的差距。
ELISA法檢測食品同樣存在一定弊端, 如難以同時分
析多種成分, 對某些結(jié)構(gòu)類似物的分析檢測仍會出現(xiàn)交叉
反應(yīng)影響檢測結(jié)果, 過度依賴試劑的選擇等。這些問題導(dǎo)
致目前食品安全檢測中ELISA 檢測技術(shù)具有一定的局限
性, 這就需要更多學(xué)者對其進行深入研究?？赏ㄟ^研究開
發(fā)可催化不同底物反應(yīng)生成不同顏色的酶制劑以達到同時
測定多種成分; 開發(fā)高度免疫性的重組抗原來代替無法分
離的原始抗原物質(zhì); 與其他檢測方法如PCR、色譜技術(shù)等
相結(jié)合等一系列方式對ELISA 檢測技術(shù)進行深層次研究,
擴大其優(yōu)勢、改善弊端。相信通過不斷深入的研究, ELISA
技術(shù)在未來食品安全的快速檢測技術(shù)中將占據(jù)越來越重要
的地位, 從而使食品安全檢測技術(shù)愈加簡單方便。
參考文獻
[1] 肖 玫, 陳連勇. 酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用與前景[J]. 食品科學(xué), 2007,
27(12): 916?919.
Xiao M, Chen LY. Application and Prospect of Enzymes In the Food Industry
[J]. Food Sci, 2007, 27(12): 916?919.
[2] 汪世華, 白文釗, 張俊, 等. 我國酶制劑的現(xiàn)狀及其發(fā)展前景[J]. 冷飲
與速凍食品工業(yè), 2002, 8(2): 42?44.
Wang SH, Bai WZ, Zhang J, et al. Current Situation and Prospects of Enzymes
[J]. Frozen Food Ind, 2002, 8(2): 42?44.
[3] Engvall E, Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
quanittative assay of immuno-globulin G [J]. Immunochemistry, 1971,
8(9): 871?874.
[4] 高春燕, 張百剛. 酶制劑在食品分析檢測中的應(yīng)用[J]. 大理學(xué)院學(xué)報:
綜合版, 2007, 6(2): 5?7.
Gao CY, Zhang BG. Enzymes in Food Analysis Detection [J]. J Dali UnivIntegration,
2007, 6(2): 5?7.
[5] 陳怡婷. 簡析食品檢測新技術(shù)的應(yīng)用[J]. 食品工程, 2014, 1(3): 10?11.
Chen YT. Analysis and application of new technology in food inspection
[J]. Food Engineer. 2014, 1(3): 10?11.
[6] 唐英章.現(xiàn)代食品安全檢測技術(shù)[M].北京:科學(xué)出版社, 2004: 364,
380?381
Tang YZ. Modern Food Safety Testing Technology [M]. Beijing: Science
Press, 2004: 364, 380?381
[7] 鄒康平 王冬, 食品檢驗中的生物檢測技術(shù)應(yīng)用[J]. 黑龍江科技信息,
2012, 34: 27?28.
Zou KP, Wang D, The technology of biological detection in food inspection
[J]. Heilongjiang Sci Technol Inform, 2002, 8(23): 85?87.
[8] 虞 淼,勵建榮.酶制劑在食品加工保鮮與檢測中的應(yīng)用[J]. 保鮮與加工,
2006, 3(6):37?39.
Yu M, Li JR. Enzymes used in food processing preservation and detection
[J]. Pres Process, 2006, 3(6): 37?39.
[9] 江漢湖.食品免疫學(xué)導(dǎo)論[M]. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2006: 192?193
Jiang HH. Introduction to Food Immunology [M]. Beijing: Chemical Industry
Press, 2006: 192?193
[10] 李玉珍, 林親錄, 肖懷秋. 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)及其在食品安全檢測中
的應(yīng)用研究進展[J]. 中國食品添加劑, 2006, (3): 108?112.
Li YZ, Lin QL, Xiao HQ. Advances in technology and its application in
ELISA food safety inspection [J]. China Food Addit, 2006, (3): 108?112.
[11] 梁寶東, 張惟廣. 酶聯(lián)免疫技術(shù)及其在食品檢測中的應(yīng)用[J]. 肉類工
業(yè), 2005 (3): 42?44.
Liang BD, Zhang WG. Enzyme-linked Immunosorbent Technology and its
application in food inspection [J]. Meat Ind, 2005, (3): 42?44.
[12] 肖韡, 買娜, 王旭峰, 等. 酶聯(lián)免疫吸附法在植物性食品安全, 檢測中
的應(yīng)用[J]. 食品科學(xué), 2007, 27(12): 920?923.
3274 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報 第5 卷
Xiao W, Mai N, Wang XF, et al. Application of ELISA method in analysis
of phytogenic food safety [J]. Food Sci, 2007, 27(12): 920?923.
[13] 張占軍, 王富花. 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)及其在食品安全檢測中的應(yīng)用[J].
食品研究與開發(fā), 2011, 32(1): 157?160.
Zhang ZJ, Wang FH. ELISA technique and its application in food safety
testing [J]. Food Res Dev, 2011, 32(1): 157?160.
[14] Charles DE, Remo PV, Russell RG, et al. Development of a radioimmunoassay
for parathion [J]. Agric, Food Chem, 1981, 29: 559?563．
[15] Ibrahim AM, Morsy MA, Hewedi MM, et al. Monoclonal antibody-based
ELISA for the detection of ethyl parathion [J]. Food agri immunol, 1994,
6(1): 23?30.
[16] Katsoudas E, Abdelmesseh HH. Enzyme inhibition and enyme-linked
immunosorbent assay methods for carbamate pesticide residue analysis in
fresh produce [J]. J Food Prot, 2000, 63(12): 1758?1760.
[17] Lee JK, Ahn KC, Stoutamire DW, et al. Development of an enzyme-linked
immunosorbent assay for the detection of the organophorus insecticide
acephate[J]．J Agri Food Chem, 2003, 51(13): 3695?3703．
[18] 朱國念. 克百威殘留檢測直接竟?fàn)嶦LISA 試劑盒的研究[J]. 中國食品
學(xué)報, 2003, 3(3): 31?34.
Zhu GN. Research Carbofuran residues direct competitive ELISA kit [J]. J
Chin Institute Food Sci Technol, 2003, 3(3): 31?34.
[19] Kumar MA, Chouhan RS, Thakur MS, et al. Automated flow enzyme-
linked immunosorbent assay (ELISA) system for analysis of methyl
parathion [J]. Anal chim Acta, 2006, 560(1): 30?34.
[20] Yang ZY, Kolosova AY, Shim WB, et al. Development of monoclonal antibodies
against pirimiphos-methyl and their application to IC-ELISA [J]. J
Agri Food Chem, 2006, 54(13): 4551?4556.
[21] Shim JY, Kim YA, Lee EH, et al. Development of enzyme-linked immunosorbent
assays for the organophosphorus insecticide EPN [J]. J Agri
Food Chem, 2008, 56(24): 11551?11559.
[22] 張駿, 王碩, 鄭文杰, 等. 食品中硫丹殘留酶聯(lián)免疫吸附檢測方法的研
究[J]. 食品研究與開發(fā), 2008, 29(10): 104?108.
Zhang J, Wang S, Zheng WJ, et al. Research of endosulfan residues
ELISA detection methods in food [J]. Food Res Dev, 2008, 29(10):
104?108.
[23] 文孟棠, 劉媛, 寇莉萍, 等. 大白菜中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留半定量
ELISA 免疫檢測方法的建立[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報, 2014, 30(2):411?416.
Wen MT, Liu Y, Kou LP, et al. Development of a semi-quantitative ELISA
for detection of pyrethroid pesticides residue in chinese cabbage [J].
Jiangsu J Agri Sci, 2014, 30(2): 411?416.
[24] 郭玉蓮, 農(nóng)藥殘留的酶聯(lián)免疫分析技術(shù)及研究進展[J]. 農(nóng)機化研究,
2006, 2 (2): 201?203.
Guo YL, Progress of Pesticide Residues and Enzyme-linked Immunoassay
Technology [J]. Agri Mech Res, 2006, 2 (2): 201?203.
[25] 王守法, 闞春月, 許學(xué)書. 酶聯(lián)免疫吸附試驗在食品檢測中的應(yīng)用[J].
食品科學(xué), 2009, 23(30): 489?492.
Wang SF, Kan CY, Xu XS. ELISA Applications in Food Detection [J].
Food Sci, 2009, 23(30): 489?492.
[26] 宋宏新, 馬娜. 食品中病原微生物快速檢測方法研究進展[J]. 食品研
究與開發(fā), 2005, 26(2): 127?130.
Song HX, Ma N. Advances in Rapid Detection of Pathogens in Food [J].
Food Res Dev, 2005, 26(2): 127?130.
[27] Lin HH, Lister RM, Cousin MA. Enzyme‐linked immunosorbent assay
for detection of mold in tomato puree[J]. J Food Sci, 1986, 51(1):
180?183.
[28] 文其乙, 焦新安. 直接 ELISA 檢測沙門氏菌方法的建立及其應(yīng)用研
究[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報, 1995, 15(2): 105?111.
Wen QY, Jiao XA. Establishment and application of direct ELISA method
to detect salmonella [J]. J Vet Sci, 1995, 15(2): 105?111.
[29] Yu KY, Noh Y, Chung M, et al. Use of monoclonal antibodies that recognize
p60 for identification of Listeria monocytogenes [J]. Clin diagn lab
immun, 2004, 11(3): 446?451.
[30] 吳大成, 孫洋, 袁潔, 等. 雙抗夾心 ELISA 檢測腸出血性大腸桿菌
O157 方法的建立[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報, 2012, 31(12): 1745?1748.
Wu DC, Sun Y, Yuan J, et al. Establishment of double-antibody sandwich
ELISA detection of EHEC O157 method [J]. J Vet Sci, 2012, 31(12):
1745?1748.
[31] 馬頎, 任珊, 許美玉. 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品安全檢測中的應(yīng)用[J].
食品科技, 2008, 33(1): 200?204.
Ma Q, Ren S, Xu MY. ELISA technique in the detection of food safety [J].
Food Sci Tech, 2008, 33(1): 200?204.
[32] 宓曉黎. 黃曲霉毒素分析方法研究報告[J]. 糧食與飼料工業(yè), 1994, 10:
41.
Mi XL. Report of Aflatoxin analysis [J]. Food Feed Ind, 1994, 10: 41.
[33] Chu FS, Huang X, Wei RD, et al. Production and characterization of antibodies
against microcystins [J]. Appl environ microb, 1989, 55(8):
1928?1933.
[34] 劉冬兒. 酶聯(lián)免疫吸附分析法測定食品中的黃曲霉毒素B1[J]. 食品工
業(yè)科技, 2002, 23(10): 79-80.
Liu DR. Determination of Aflatoxin B1 by Enzyme-linked Immunosorbent
Assay [J]. Sci Technol Food Ind, 2002, 23(10): 79?80.
[35] 董雪, 鐘青萍, 黃安誠, 等. 河豚毒素直接競爭 ELISA 檢測方法的研
究[J]. 現(xiàn)代食品科技, 2009, 25(8): 977?981
Dong X, Zhong QP, Huang AC, et al. Development of a direct competitive
ELISA method for tetrodotoxin detection [J]. Mod Food Sci Technol, 2009,
25(8): 977?981
[36] 田銀芳, 王翌明. ELISA 方法與國標(biāo)法在檢測鮮奶中沙門氏菌的比較
[J]. 中國乳品工業(yè), 1998, 26(5): 32?33.
Tian YF, Wang LM. Comparison of ELISA method with the national standard
method in the detection of Salmonella in milk [J]. China Dairy Ind,
1998, 26(5): 32?33.
[37] Rogan GJ, DudinYA, LeeTC, et al. Immundoiagnostic mehtods for detection
of 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase in Roundup Ready
soybeans[J]. Food Control, 1999, 10: 407?414．
[38] 林良斌, 周小云. 轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜的 ELISA 分析[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
學(xué)報: 自然科學(xué)版, 2001, 27(3): 179?181.
Lin LB, Zhou XY. ELISA analysis of Insect-resistant Transgenic Oilseed
Rape [J]. Hunan Agric Univ: Nat Sci, 2001, 27(3): 179?181.
[39] 劉光明, 蘇文金. 應(yīng)用 ELISA 定量檢測轉(zhuǎn)基因玉米中Bt1 蛋白的研究
[J]. 食品科學(xué), 2002, 23(8): 217?221.
Liu GM, Su WJ. Application of ELISA quantification of genetically modified
maize Bt1 protein [J]. Food Sci, 2002, 23(8): 217?221.
[40] 顧煒煒, 潘家榮. 轉(zhuǎn)基因食品中 Btcry2Ab/2Ac 殺蟲蛋白直接競爭
ELISA 試劑盒的研制[J]. 食品科技, 2007, 6: 203?206.
Gu WW, Pan JR. Developed of direct competitive ELISA kit of
btcry2Ab/2Ac insecticidal protein in genetically modified foods [J]. Food
第10 期 石 超, 等: 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品檢測分析中的研究進展 3275
Sci Tech, 2007, 6: 203?206.
[41] 劉功良, 王菊芳, 李志勇, 等. 重金屬離子的免疫檢測研究進展[J]. 生
物工程學(xué)報, 2007, 22(6): 877?881.
Liu GL, Wang JF, Li ZY, et al. Progress of immunological detection of
heavy metal ions [J]. J Biotechnol, 2007, 22(6): 877?881.
[42] 趙之偉, 曹冠華, 李濤. 金屬硫蛋白的研究進展[J]. 云南大學(xué)學(xué)報 (自
然科學(xué)版), 2013, 35(3): 390?398.
Zhao ZW, Cao GH, Li T. Progress Metallothionein [J]. Yunnan Univ (Nat
Sci), 2013, 35(3): 390?398.
[43] 劉靜, 陳慶森. 食品過敏原研究進展及其在食品安全重要性方面的探
討[J]. 食品科技, 2006, 31(4): 1?4.
Novel programs of food anaphylactogen and the importance of anaphylactogen
in food security[J]. Food Sci Tech, 2006, 31(4): 1?4.
[44] 李霜, 薛強, 李莉, 等. 三聚氰胺 ELISA 檢測試劑盒評價研究[J]. 食
品科技, 2014, 39(1): 317?321.
Li S, Xue Q, Li L, et al. Evaluation of melamine ELISA detection kit[J].
Food Sci Tech, 2014, 39(1): 317?321.
(責(zé)任編輯: 白洪健)
作者簡介
石 超, 碩士研究生, 主要研究方向
為農(nóng)產(chǎn)品貯藏加工。
E-mail: shichao0147@163.com
呂長鑫, 教授, 主要研究方向為農(nóng)產(chǎn)
品貯藏加工與食品資源開發(fā)。
E-mail: lvchangxin6666@163.com
馮敘橋, 教授, 主要研究方向為果蔬
質(zhì)量與安全控制。

網(wǎng)友評論 more

食品安全論文最新內(nèi)容

07-10