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日本食品中農(nóng)藥殘留等檢測(cè)方法評(píng)價(jià)指南

文檔作者：岳振峰 1 張志旭2 文檔來(lái)源： 1. 深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心 2. 山東出入境檢驗(yàn)檢疫局食品農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中心		點(diǎn) 擊數(shù)：	更新時(shí)間： 2025年07月13日
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第5 卷第 2 期食 品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)Vol. 5 No. 2
2014 年2 月Journal of Food Safety and Quality Feb. , 2014
基金項(xiàng)目: 國(guó)家質(zhì)檢總局局科技計(jì)劃基金項(xiàng)目(2013IK197)、公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(2012104020)
Fund: Supported by the Science and Technology Fund of AQSIQ of China (2013IK197) and Fund for Public Benefit Project of Quality
Supervision of AQSIQ of China (2012104020)
*通訊作者: 岳振峰, 研究員, 主要研究方向?yàn)槭称钒踩珯z測(cè)。E-mail: yuezhenfeng@163.com
*Corresponding author: YUE Zhen-Feng, Professor, Room 1313, CIQ Building A, 1011, Fuqiang Road, Futian District, Shenzhen 518045,
China. E-mail: yuezhenfeng@163.com
日本食品中農(nóng)藥殘留等檢測(cè)方法評(píng)價(jià)指南
岳振峰 1*, 張志旭2 譯
(1. 深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心, 深圳市食品安全檢測(cè)技術(shù)研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 深圳 518045;
2. 山東出入境檢驗(yàn)檢疫局食品農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中心, 青島 266002)
Japan guidance for the evaluation on the validity of the method for testing
residues of pesticides and other substances in food
YUE Zhen-Feng1*, ZHANG Zhi-Xu2 Translation
(1. Key Laboratory of Detection Technology R &amp;amp; D on Food Safety, Food Inspection and Quarantine Center,
Shenzhen Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shenzhen 518045, China;
2. The Food and Agricultural Products Testing Agency of Shandong Entry-Exit Inspection And Quarantine Bureau, Qingdao
266002, China)
1 引 言
本文全文譯自日本厚生勞動(dòng)省官方網(wǎng)站日文版
公開(kāi)文件“食品中に殘留する農(nóng)薬等に関する試験法
の妥當(dāng)性評(píng)価ガイドラインの一部改正につい
て”(食安発1224 第1 號(hào)平成 22 年12 月24 日), 以
作為我國(guó)食品安全科技工作者研發(fā)殘留檢測(cè)方法或
與日本檢測(cè)機(jī)構(gòu)交流的參考。
2 內(nèi) 容
本指南中的檢測(cè)方法是指為判斷食品是否符合
日本食品安全標(biāo)準(zhǔn), 對(duì)其中農(nóng)藥殘留等進(jìn)行檢測(cè)時(shí)
使用的方法。本指南規(guī)定了日本各檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)其使用
檢測(cè)方法進(jìn)行方法評(píng)價(jià)的程序。另外, 本指南以儀器
分析法為對(duì)象。
注: 本指南為檢測(cè)方法驗(yàn)證的一個(gè)例子, 也可
以使用被國(guó)際上公認(rèn)的其他方法評(píng)價(jià)程序。本指南符
合ISO 5724-1994 及JIS Z 8402-1999, 規(guī)定了食品中
農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)方法的評(píng)價(jià)程序。
3 適用范圍
判斷食品是否符合日本食品限量標(biāo)準(zhǔn)時(shí), 對(duì)其
中的農(nóng)藥、飼料添加劑、獸藥殘留進(jìn)行檢測(cè)時(shí)使用的
檢測(cè)方法(告示法注1、通知法注2 及其他方法)。
注 1: 食品、添加劑等限量標(biāo)準(zhǔn)(1959 年厚生
省告示第370 號(hào))第1 食品部分 A 食品成分標(biāo)準(zhǔn)
5、6、7
注2: 《食品中農(nóng)藥殘留、飼料添加劑及獸藥成
分物質(zhì)的檢測(cè)方法》(2005 年1 月24 日食安發(fā)第
0124001 號(hào))
4 術(shù)語(yǔ)與定義
在本指南中, 術(shù)語(yǔ)的定義如下:
(1)“選擇性”是指在設(shè)想試料中分析物存在的條
件下, 正確測(cè)定分析物的能力。
(2)“準(zhǔn)確度”是指從充分?jǐn)?shù)量試驗(yàn)結(jié)果得到的平
均值與被驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)值(添加濃度)的一致程度。
(3)“精密度”是指在指定的條件下進(jìn)行反復(fù)的相
324 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)第 5 卷
互獨(dú)立的試驗(yàn)結(jié)果間的一致程度。
(4)“重復(fù)性”是指對(duì)于被認(rèn)為是同一試料的測(cè)定
中, 利用同一方法、在同一實(shí)驗(yàn)室、同一人員利用同
一裝置, 短時(shí)間內(nèi)在獨(dú)立試驗(yàn)結(jié)果條件下(并行條件)
所測(cè)定結(jié)果的精密度。
(5)“室內(nèi)精密度”是指對(duì)于被認(rèn)為是同一試料的
測(cè)定中, 利用同一方法、在同一實(shí)驗(yàn)室、獲得獨(dú)立試
驗(yàn)結(jié)果條件下(室內(nèi)條件)所測(cè)定結(jié)果的精密度。
(6)“定量限”是指在具有一定精確性的基礎(chǔ)上,
可以檢出分析物的最低量或濃度。本指南中, 原則上
使用通知法所提示的定量限。對(duì)于不得檢出的物質(zhì),
使用「關(guān)于食品衛(wèi)生法第11 條第3 項(xiàng)實(shí)行通知」(2005
年11 月29 日食安發(fā)的129001 號(hào)食品安全部長(zhǎng)通知)
中規(guī)定的檢出限, 與定量限同義。
(7)“分支實(shí)驗(yàn)”是指只改變1 個(gè)實(shí)驗(yàn)條件保持其
他實(shí)驗(yàn)條件不變的實(shí)驗(yàn)計(jì)劃。
5 評(píng)價(jià)方法
對(duì)各種食品, 在不含被測(cè)農(nóng)藥的樣品(空白樣品)
中添加被測(cè)農(nóng)藥(加標(biāo)樣品), 按照檢測(cè)方法對(duì)加標(biāo)樣
品進(jìn)行檢測(cè), 從得到的檢測(cè)結(jié)果求出以下的參數(shù)(選
擇性、準(zhǔn)確度、精密度、定量限), 檢驗(yàn)是否與各個(gè)
目標(biāo)值相符合。
添加濃度, 原則上為該食品相對(duì)應(yīng)的農(nóng)藥殘留
限量值。對(duì)于告示中規(guī)定的「不得檢出」物質(zhì), 按照
施行通知中規(guī)定的檢出限(在本指南中也稱為定量限)
進(jìn)行添加。
多殘留檢測(cè)方法中, 由于各農(nóng)藥的限量值不同,
添加濃度無(wú)法是各農(nóng)藥的限量值, 添加濃度可以為
“各農(nóng)藥限量值相近的一定濃度”及“一律標(biāo)準(zhǔn)濃度”
(譯者注:“一律標(biāo)準(zhǔn)”是日本對(duì)既非“豁免物質(zhì)”也
未制定“最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)”的農(nóng)業(yè)化學(xué)品在食品中
的殘留制定的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn), 日本確定的“一律標(biāo)準(zhǔn)”為
0.01 mg/kg)2 個(gè)濃度水平。(參考表1)
(1) 選擇性
按照檢測(cè)方法對(duì)空白樣品進(jìn)行檢測(cè), 驗(yàn)證是否
存在對(duì)定量造成干擾的峰(干擾峰)。
如果發(fā)現(xiàn)有干擾峰, 則需要將干擾峰的峰面積
(或峰高)同測(cè)得限量值或定量限相對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的
峰面積(或峰高)進(jìn)行比較, 判斷是否滿足以下要求
(參考表2)。
定量限如果是限量值的 1/3 以下時(shí), 則干擾峰的
面積(或峰高)應(yīng)小于限量值對(duì)應(yīng)峰面積(或峰高)的
1/10。
定量限如果超過(guò)限量值的 1/3 時(shí), 則干擾峰的峰
面積(或峰高)應(yīng)小于相當(dāng)于定量限濃度的峰面積(或
者峰高)的1/3。
對(duì)于告示中規(guī)定農(nóng)藥的限量值為「不得檢出」時(shí),
干擾峰的峰面積(或峰高)應(yīng)小于相當(dāng)于施行通知規(guī)
定的檢出限(本指南中稱為定量限)濃度的峰面積(或
者峰高)的1/3。
(2)準(zhǔn)確度
對(duì) 5 個(gè)以上的加標(biāo)樣品, 按試驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè),
求出所得到檢測(cè)結(jié)果的平均值, 計(jì)算與添加濃度的
比值, 以此為準(zhǔn)確度, 準(zhǔn)確度的目標(biāo)值如表3 所示。
表 1 限量值和添加濃度
Table 1 MRL and fortified concentration
限量值添加濃度
不得檢出 定量限
不得檢出以外
限量值，但對(duì)于多殘留方法為“各農(nóng)藥限
量值相近的一定濃度”及一律標(biāo)準(zhǔn)濃度2
個(gè)濃度水平
表 2 干擾峰的允許范圍
Table 2 Permitted range of interference peak
定量限與限量值的關(guān)系干擾峰的允許范圍
定量限≦限量值的1/3 ＜限量值峰的1/10
定量限＞限量值的1/3 ＜檢出限峰的1/3
不得檢出＜檢出限峰的1/3
表3 準(zhǔn)確度以及精密度目標(biāo)值
Table 3 Target value of accuracy and precision
濃度(10-6) 準(zhǔn)確度(回收率)(%) 重復(fù)性(RSD%) 室內(nèi)精密度(RSD%)
≤ 0.001 70~120 <30 <35
0.001~0.01 70~120 <25 <30
0.01~0.1 70~120 <15 <20
0.1 < 70~120 <10 <15
第2 期岳振峰, 等: 日本食品中農(nóng)藥殘留等檢測(cè)方法評(píng)價(jià)指南 325
注: 在使用內(nèi)標(biāo)(以矯正準(zhǔn)確度的變動(dòng)為目的,
添加在分析試料中的穩(wěn)定同位素標(biāo)準(zhǔn)品)時(shí), 內(nèi)標(biāo)的
回收率應(yīng)在40%以上。
(3)精密度
對(duì)加標(biāo)樣品進(jìn)行重復(fù)分析, 求出檢測(cè)結(jié)果的標(biāo)
準(zhǔn)偏差以及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差, 對(duì)重復(fù)性以及多個(gè)分析
者或者分析日期的室內(nèi)精密度進(jìn)行評(píng)價(jià)。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的
次數(shù)為4 次以上。準(zhǔn)確度、重復(fù)性以及室內(nèi)精密度的
目標(biāo)值如表3 所示。
(4)定量限
當(dāng)限量值與定量限一致時(shí), 或限量值是告示規(guī)
定的「不得檢出」時(shí), 驗(yàn)證是否滿足以下條件。
① 對(duì)添加樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析時(shí), 準(zhǔn)確
度、重復(fù)性以及室內(nèi)精密度必須滿足表2 的目標(biāo)值。
② 通過(guò)色譜進(jìn)行的分析, 必須保證定量限相對(duì)
應(yīng)的濃度所獲得的峰(①得到的峰或者使用空白基質(zhì)
溶液制備的標(biāo)準(zhǔn)溶液等得到的峰)的S/N≧10。
實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備采用的檢測(cè)方法若已經(jīng)根據(jù)本指南
進(jìn)行了評(píng)價(jià)或者僅對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行部分變更時(shí), 部
分上述性能指標(biāo)不必進(jìn)行再次驗(yàn)證, 此種情況下需
要驗(yàn)證的內(nèi)容詳見(jiàn)附件1。
通過(guò)分支實(shí)驗(yàn), 可以對(duì)準(zhǔn)確度、重復(fù)性及室內(nèi)精
密度進(jìn)行同時(shí)驗(yàn)證(參考附件2)。添加水平符合要求
時(shí), 可以從已有的數(shù)據(jù)中計(jì)算準(zhǔn)確度、重復(fù)性及室內(nèi)
精密度(參考附件3)。
6 進(jìn)行添加的食品種類以及添加濃度
(1)進(jìn)行添加的食品種類
進(jìn)行添加的食品, 原則上從檢測(cè)方法預(yù)期適用
的食品種類中進(jìn)行選擇。如果考慮一律標(biāo)準(zhǔn), 則所有
的食品都成為對(duì)象, 而現(xiàn)實(shí)上對(duì)所有的食品都進(jìn)行
方法驗(yàn)證是困難的, 因此應(yīng)選擇具有代表性的食品。
具體來(lái)說(shuō), 考慮到成分特性以及提取方法的不同, 根
據(jù)檢測(cè)目的, 原則上選擇下列種類。
① 農(nóng)產(chǎn)品
? 谷類(糙米等)
? 豆類(大豆等)
? 籽類
? 蔬菜(菠菜等含有豐富葉綠素的種類、圓白菜
等含有硫化合物的種類以及馬鈴薯等含有豐富淀粉
的種類)
? 果實(shí)(柑桔、蘋果等)
? 茶
? 啤酒花
? 香辛料等
② 畜水產(chǎn)品
? 牛、豬、雞等的肌肉
? 牛、豬、雞等的脂肪
? 牛、豬、雞等的肝臟
? 牛、豬、雞等的腎臟
? 雞蛋
? 牛奶
? 蜂蜜等蜂產(chǎn)品
? 水產(chǎn)品(鰻魚等脂肪含量豐富的種類)等
(2) 關(guān)于加標(biāo)樣品制備的注意事項(xiàng)
① 制備加標(biāo)樣品時(shí), 原則上使用新鮮的食品,
均質(zhì)后稱量并進(jìn)行待測(cè)農(nóng)藥等的添加。
由于冷凍食品或者用冷凍食品均質(zhì)的樣品可能
會(huì)導(dǎo)致食品成分發(fā)生變化, 應(yīng)盡可能避免使用。蔬
菜、水果等除冷凍保存以外其他方法無(wú)法長(zhǎng)期保存的
樣品, 可以將其在原始狀態(tài)下冷凍使用, 但應(yīng)注意避
免重復(fù)的冷凍、解凍。
添加農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的量應(yīng)該盡量少, 以樣品的
1/10～1/20 左右為最佳。溶劑要使用可以與樣品混合
的溶劑。在添加農(nóng)藥等后, 充分進(jìn)行混合, 放置30
min 左右再進(jìn)行提取操作。
② 如分支實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)需要進(jìn)行幾天時(shí), 應(yīng)將均
一化的試料進(jìn)行冷凍保存, 并應(yīng)注意避免反復(fù)進(jìn)行
凍結(jié)以及解凍, 在實(shí)施試驗(yàn)的當(dāng)天制備添加樣品。
附件 1
使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢測(cè)方法或者檢測(cè)方法部分變
更時(shí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)驗(yàn)證的內(nèi)容
1 使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢測(cè)方法時(shí)
原則上應(yīng)對(duì)本指南規(guī)定的除室內(nèi)精密度以外的
性能指標(biāo)進(jìn)行確認(rèn)。
2 經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢測(cè)方法用于未驗(yàn)證食品基質(zhì)檢
測(cè)時(shí)
使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證或確認(rèn)的檢測(cè)方法用于同驗(yàn)證食
品基質(zhì)類似的食品檢測(cè)時(shí), 應(yīng)對(duì)選擇性及準(zhǔn)確度進(jìn)
行驗(yàn)證, 必要時(shí)應(yīng)驗(yàn)證重復(fù)性。當(dāng)限量值同定量限相
同時(shí), 或者限量值為「不得檢出」時(shí), 還應(yīng)對(duì)定量限
326 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)第 5 卷
進(jìn)行驗(yàn)證。
3 部分變更經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢測(cè)方法時(shí)
實(shí)驗(yàn)室部分變更經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的檢測(cè)方法時(shí), 可以
不驗(yàn)證本指南規(guī)定的部分性能指標(biāo)。但是, 選擇性和
準(zhǔn)確度必須進(jìn)行重新驗(yàn)證。
對(duì)于最終定容體積或測(cè)定條件(進(jìn)樣量、分析用
色譜柱的種類及規(guī)格、載氣的種類、升溫條件、流動(dòng)
相的組成、流速、梯度條件、柱溫、MS 測(cè)定模式及
測(cè)定離子)改變時(shí), 應(yīng)驗(yàn)證選擇性和準(zhǔn)確度, 必要時(shí)
應(yīng)驗(yàn)證重復(fù)性。當(dāng)限量值同定量限相同時(shí), 或者限量
值為「不得檢出」時(shí), 還應(yīng)對(duì)定量限進(jìn)行驗(yàn)證。
上述條件以外的變更情況, 包括方法的選擇性、
準(zhǔn)確度在內(nèi)的檢測(cè)方法性能有發(fā)生重大變化的可能
性, 此時(shí)不能看作是經(jīng)過(guò)驗(yàn)證檢測(cè)方法的部分變更,
應(yīng)將其看作新的方法, 根據(jù)本指南進(jìn)行全面驗(yàn)證。特
別是盡可能避免改變稱樣量、取樣方法、提取溶劑的
種類或體積等條件。
附件 2
室內(nèi)精密度驗(yàn)證的實(shí)例
驗(yàn)證計(jì)劃為: 一名實(shí)驗(yàn)人員, 對(duì)同一加標(biāo)樣品
進(jìn)行1 日1 次(2 平行)測(cè)試, 共測(cè)試5 天
此時(shí)可使用重復(fù)測(cè)試2 個(gè)平行樣的內(nèi)部質(zhì)控?cái)?shù)
據(jù)或/和檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行的2 個(gè)平行的加標(biāo)樣品的數(shù)據(jù)。
(例2)2 名分析者分別對(duì)加標(biāo)樣品進(jìn)行1 天1 次(2
個(gè)平行)、為期3 天的方法驗(yàn)證的計(jì)劃
(例3)5 個(gè)檢測(cè)機(jī)構(gòu), 使用同一基質(zhì)進(jìn)行1 日1
次(2 平行)的加標(biāo)樣品測(cè)試的驗(yàn)證計(jì)劃
附件 3
使用已有數(shù)據(jù)進(jìn)行方法性能評(píng)價(jià)
1 使用內(nèi)部質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)
食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的機(jī)構(gòu), 應(yīng)按照{(diào)關(guān)于實(shí)施
食品衛(wèi)生檢測(cè)機(jī)構(gòu)業(yè)務(wù)管理的通知(1996 年4 月1 日
衛(wèi)食第117 號(hào))附件內(nèi)部質(zhì)控通用規(guī)定}, 實(shí)施內(nèi)部
質(zhì)控管理。如果有相關(guān)檢測(cè)方法的內(nèi)部質(zhì)控測(cè)試數(shù)據(jù)
時(shí), 相關(guān)數(shù)據(jù)可以作為該方法驗(yàn)證數(shù)據(jù)使用。
在內(nèi)部質(zhì)控管理通用規(guī)定中規(guī)定, 檢測(cè)機(jī)構(gòu)應(yīng)
定期進(jìn)行陰性對(duì)照樣品(空白樣品)及已知添加濃度
水平的樣品(加標(biāo)樣品)的測(cè)試, 同時(shí)還應(yīng)定期進(jìn)行平
行重復(fù)5 次的已知添加濃度的加標(biāo)回收樣品的測(cè)試。
使用上述數(shù)據(jù)可以進(jìn)行方法性能指標(biāo)的評(píng)價(jià):
① 陰性對(duì)照樣品(空白樣品)的結(jié)果用于選擇性
評(píng)價(jià)。
② 計(jì)算定期進(jìn)行的已知添加濃度加標(biāo)樣品的5
平行重復(fù)測(cè)試結(jié)果的平均值可以求得準(zhǔn)確度, 計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)偏差可以得到室內(nèi)精密度。如果內(nèi)部質(zhì)控得到的
結(jié)果是確定添加濃度的2 平行數(shù)據(jù), 可以按照附件2
的實(shí)例, 得到準(zhǔn)確度、重復(fù)性、室內(nèi)精密度。
③ 如果有 5 次定期對(duì)已知添加濃度的加標(biāo)樣品
的5 平行測(cè)試數(shù)據(jù), 可以從中算出準(zhǔn)確度、重復(fù)性、
室內(nèi)精密度。
可以將每次檢測(cè)中的加標(biāo)回收樣品數(shù)據(jù)作為方
法驗(yàn)證數(shù)據(jù)使用
實(shí)際使用待驗(yàn)證檢測(cè)方法進(jìn)行了檢測(cè), 對(duì)空白
樣品進(jìn)行的已知添加濃度的加標(biāo)回收樣品測(cè)試結(jié)果
可作為方法驗(yàn)證數(shù)據(jù)使用。
一般進(jìn)行樣品檢測(cè)的過(guò)程中, 會(huì)同時(shí)進(jìn)行1~3
個(gè)空白樣品及已知添加濃度的加標(biāo)回收試驗(yàn)。此數(shù)據(jù)
可以用于方法評(píng)價(jià):
① 空白試驗(yàn)結(jié)果可用于評(píng)價(jià)方法的選擇性。
② 每次檢測(cè)中, 得到2~3 個(gè)已知添加濃度的加
標(biāo)回收數(shù)據(jù)時(shí), 使用5 次以上的數(shù)據(jù)參考附件2 實(shí)例,
計(jì)算出準(zhǔn)確度、重復(fù)性、室內(nèi)精密度。
第2 期岳振峰, 等: 日本食品中農(nóng)藥殘留等檢測(cè)方法評(píng)價(jià)指南 327
③ 每次檢測(cè)中, 得到1 個(gè)已知添加濃度的添加
回收數(shù)據(jù)時(shí), 使用5 次以上數(shù)據(jù)的平均值計(jì)算準(zhǔn)確
度、從標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算室內(nèi)精密度。雖然規(guī)定重復(fù)性需
要另外在相同條件下重復(fù)進(jìn)行5 平行試驗(yàn)計(jì)算得出,
但如果室內(nèi)精密度結(jié)果優(yōu)于重復(fù)性的目標(biāo)值, 可以
認(rèn)為重復(fù)性也滿足目標(biāo)值。
(責(zé)任編輯:趙靜)
作者簡(jiǎn)介
岳振峰, 研究員, 主要主要研究方向
為食品質(zhì)量安全檢測(cè)。
E-mail: yuezhenfeng@163.com

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